无钙镁离子磷酸缓冲盐水(PBS)

上海金畔生物科技有限公司提供无钙镁离子磷酸缓冲盐水(PBS)
需要PBS(-) 和MEM的科研人员可以联系我。有现货 PBS配方 经典配方(转) A液:0.1mol/L磷酸二氢钾: 磷酸二氢钾(KH2PO4,MW136.09)1.361g,加双蒸水至100ml。
PBS配方 经典配方 的详细介绍
PBS配方 经典配方
需要PBS(-) 和MEM的科研人员可以联系我。
PBS配方 经典配方
A液:0.1mol/L磷酸二氢钾:
磷酸二氢钾(KH2PO4,MW136.09)1.361g,加双蒸水至100ml。
B液:0.1mol/L磷酸氢二钠:
酸酸氢二钠(Na2HPO4.2H2O,MW177.99)1.78g,加双蒸水至100ml。
或者酸酸氢二钠(Na2HPO4.12H2O,MW358.14)3.58g,加双蒸水至100ml。
pH -- A液 (ml) -- B液(ml)
5.60 -- 9.50 -- 0.25
5.91 -- 9.00 -- 1.00
6.24 -- 8.00 -- 2.00
6.47 -- 7.00 -- 3.00
6.64 -- 6.00 -- 4.00
6.81 -- 5.00 -- 5.00
6.98 -- 4.00 -- 6.00
7.17 -- 3.00 -- 7.00
7.38 -- 2.00 -- 8.00
7.73 -- 1.00 -- 9.00
8.04 -- 0.50 -- 9.50
 
一般免疫组化用PBS都只包含Na2HPO412H2O(磷酸氢二钠)
NaH2PO42H2O(磷酸二氢钠)Nacl
用于细胞培养的PBS需含有氯化钾
 
称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可0.01M
PBS缓冲液
称取NaCl 8g,KCl 0.2g,Na2HPO412H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g,溶于900ml双蒸水中,用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保存备用。
PBS是最普遍不过的实验室缓冲液,但其配方各异。以下是我的总结:
母液的配制:
0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水
0.2M NaH2PO4:称取 31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水
各种浓度PB(pH=7.4)的配制:
先配 0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4, 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。
然后 只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释 即可,如:
0.1M PB(PH=7.4) :取 500ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可。
0.01M PB (PH=7.4):取50ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可。
0.02M PB (PH=7.4):取100ml 0.2 M PB,加水稀释至 1000ml 即可。
若需要 NaCL 的话,加入 NaCL 至0.9%(g/100ml)即可。
另:其它各种另 PH值的 0.2M PB(100ml)配方 :
pH       0.2M NaH2PO4(ml)   0.2M Na2HPO4(ml)
5.7             93.5                          6.5
5.8             92                             8
5.9             90                             10
6.0             87.7                          12.3
6.1             85                             15
6.2             81.5                          18.5
6.3             77.5                          22.5
6.4             73.5                          26.5
6.5             68.5                          31.5
6.6             62.5                          37.5
6.7             56.5                          43.5
6.8             51                            49
6.9              45                           55
7.0              38                           62
7.1              33                           67
7.2             28                            72
7.3              23                           77
7.4              19ml                         81ml
7.5              16                           84
7.6              13                           87
7.7             10.5                          0.5
7.8              8.5                          91.5
7.9             7                              93
8.0             5.3                           94.7
 
磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffer, PB),磷酸氢二钠和磷酸二氢钠缓冲液配方
磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffer, PB)
试剂: NaH2PO4·2H2O     Na2HPO4·12H2O
配制方法:配制时,常先配制0.2mol/L的 NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4,两者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸盐缓冲液(PB),根据需要可配制不同浓度的PB和PBS。
(1)0.2mol/L的 Na2HPO4;称取Na2HPO4.12H2O 31.2g(或 NaH2PO4·H2O 27.6g)加重蒸水至1000ml溶解。
(2)0.2mol/L的 Na2HPO4:称取NaHPO4.·12H2O 71.632g(或 Na2HPO4·7H2O 53.6g或 Na2HPO4·2H2O 35.6g)加重蒸水至1000ml溶解。
(3)0.2mol/L pH7.4的PB的配制:取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4和81ml 0.2mol/L的 Na2HPO4·12H2O,充分混合即为0.2mol/L的PB(pH约为7.4~7.5)。若pH偏高或偏低,可通过改变二者的比
例来加以调整,室温保存即可。
0.2mol/L磷酸盐缓冲液(pH5.7~8.0)
pH   0.2mol/L NaH2PO4(ml)   0.2mol/L Na2HPO4(ml)
5.7           93.5                       6.5
5.8           92.0                       8.0
5.9           90.0                     10.0
6.0           87.7                     12.3
6.1           85.0                     15.0
6.2           81.5                     18.5
6.3           77.5                     22.5
6.4           73.5                     26.5
6.5           68.5                     31.5
6.6           62.5                     37.5
6.7           56.5                     43.5
6.8           51.0                     49.0
6.9           45.0                     55.0
7.0           39.0                     61.0
7.1           33.0                     67.0
7.2           28.0                     72.0
7.3           23.0                     67.0
7.4           19.0                     81.0
7.5           16.0                     84.0
7.6           13.0                     87.0
7.7           10.5                     89.5
7.8            8.5                     91.5
7.9            7.0                     93.0
8.0            5.3                     94.7
PBS可以为三种溶液的英文缩写,分别是
1.磷酸盐缓冲溶液(phosphate buffered solution)、
2.磷酸盐缓冲盐水(phosphate buffered saline)及
3.磷酸盐缓冲钠(phosphate buffered sodium),
其配制方法不同,pH值不同,发挥的生物学作用亦不完全相同。
如无特殊说明,生物学上常用的PBS是中性磷酸盐缓冲溶液(phosphate buffered solution)。
(来自百度知道)
无钙镁离子磷酸缓冲盐水(PBS)
(0.15Mol/L PH 7.2)
NaCl 8.0g
KCl  0.2g
Na2HPO4 1.15g
(如为Na2HPO4·12H2O,则为2.89g)
KH2PO4 0.2g
将上述试剂依次溶于1 000ml去离子水中,完全溶解后,115℃高压灭菌10min~15min,存在4℃冰箱中备用。此液可用于配制和稀释细胞分散剂以及洗涤细胞培养物。
我们用的都是第二种磷酸盐缓冲盐水(phosphate buffered sodium),为什么用第三种或第一种呢这么多年以来我都以为PBS就是磷酸盐缓冲溶液,其他两种说法的英语名称常见到,不过我
一直都以为他们是差不多的东西。不同的汉语翻译倒是第一次听说。我们公司用的PBS有很多种,抗体组用的中和PBS配方就比较简单,没有K+离子, 只起到缓冲PH的作用;Na2HPO4+ KH2PO4
按照不同比例混匀,可以得到不同PH的缓冲液,用于不同目的,这个在分子生物学中用得很多; 用于活细胞或者细菌处理的,为了保持渗透压,会加入其他的溶液,最常见的就是NaCl 和
KCl调节离子浓度。以上是个人的理解,欢迎批评。
 
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上海金畔生物科技有限公司提供复合酶稳定剂AES

上海金畔生物科技有限公司提供复合酶稳定剂AES
货号:ACE0070A
包装:100g
英文名:Enzyme stabilizer AES级别:BR品牌:国产
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用于诊断试剂含酶及蛋白的稀释液、各类氧化酶、甘油磷酸氧化酶、尿酸氧化酶。单独或与
HPD联合使用效果更佳,效果明显优于“1105541-酶稳定剂”。使用量: 0.5-2.5%。
广谱酶及抗原、抗体稳定剂,节约原酶并提高效能;主要用于液体酶及工作酶的稳定,
尤其适用于诊断试剂含酶及蛋白的稀释液、各类氧化酶、甘油磷酸氧化酶、尿酸氧化酶。单独
或与HPD联合使用效果更佳,
效果明显优于“1105541-酶稳定剂”。
使用量: 0.5-2.5%。
 
 

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RE-OSM-2000 2000mOsm/Kg H2O Osmolality Standard 2000mOsm/Kg H2O渗透压标准品 12 x 5ml
RE-OSM-3000 3000mOsm/Kg H2O Osmolality Standard 3000mOsm/Kg H2O渗透压标准品 12 x 5ml
RE-POSM-240 Protein Based 240mOsm/Kg H2O Osmolality Standard 蛋白基240mOsm/Kg H2O渗透压标准品 12 x 5ml
RE-POSM-280 Protein Based 280mOsm/Kg H2O Osmolality Standard 蛋白基 280mOsm/Kg H2O渗透压标准品 12 x 5ml
RE-POSM-320 Protein Based 320mOsm/Kg H2O Osmolality Standard 蛋白基 320mOsm/Kg H2O渗透压标准品 12 x 5ml
RE-ROSM-300 Urine Based 300mOsm/Kg H2O Osmolality Standard 尿素基 300mOsm/Kg H2O渗透压标准品 12 x 5ml
RE-ROSM-800 Urine Based 800mOsm/Kg H2O Osmolality Standard 尿素基 800mOsm/Kg H2O渗透压标准品 12 x 5ml
HTF250 Heat Transfer Fluid 热载体 250ml
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标记用辣根过氧化物酶

 
上海金畔生物科技有限公司提供辣根过氧化物酶 标记用
货号:ECE0066B
包装:100mg
英文名:Peroxidase horseradish; HRP别名:HRP级别:250u/mg
辣根过氧化物酶(HRP)是一种糖蛋白,每个分子含有一个氯化血红素(protonhemin)区作辅基。酶的浓度和纯度常以辅基的含量表示。
辣根过氧化物酶,RZ>3.0, 250u/mg,ECE0066B
英文名称:Peroxidase horseradish; HRP
CAS号:9003-99-0
EINECS号:232-668-6
Enzyme Commission Number:1.11.1.7
MDL number:MFCD00071339
级别:RZ>3.0,250u/mg
Donor:hydrogen-peroxide oxidoreductase Horseradish peroxidase
辣根过氧化物酶,英文名HRP; Peroxidase horseradish。辣根过氧化物酶是一种糖蛋白,每个分子含有一个氯化血红素(protonhemin)区作辅基。酶的浓度和纯度常以辅基的含量表示。
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ECE0066B RZ>3.0,250u/mg 100mg 1周 询价 冰袋包装运输
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用途
过氧化物酶,通常来源于辣根(因此称辣根过氧化物酶),是临床检验试剂中的常用酶。该产品不但广泛用于多个生化检测项目,也广泛运用于免疫类(ELISA)试剂盒。过氧化物酶作为多个
试剂盒显色体系的关键成分,对试剂盒的质量有重要影响。辣根过氧化物酶,是酶标记法所用的一种主要酶,医药上用于测定生物体液中葡萄糖和半乳糖的含量,用作诊断酶。
辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase,HRP)比活性高,稳定,分子量小,纯酶容易制备,所以最常用。HRP是由无色的酶蛋白和棕色的铁卟啉结合而成的糖蛋白,糖含量18%。HRP由多个
同功酶组成,分子量为40,000,等电点为PH3~9,酶催化的最适PH因供氢体不同而稍有差异,但多在PH5左右。酶溶于水和58%以下饱和度硫酸铵溶液。氯化血红素辅基的最大吸收峰是403nm,
HRP酶蛋白的最大吸收峰是275nm,一般以OD403nm /OD275nm的比值RZ表示酶的纯度,计算式是:
HRP纯度(RZ)=A403nm/A275nm
纯度RZ(Reinheit Zahl)值越大说明酶内所含杂质越少。高纯度的酶RZ值应在3.0左右(最高可达3.4)。用于ELISA检测的HRP的RZ值要求在3.0以上。
1) RZ>3 活性 >250u/mg, 主要应用于免疫学,是高纯度的过氧化酶。采用特殊色谱纯化技术以除去会影响免疫学反应的同工酶B .
2) RZ>2 活性 >180u/mg ,主要应用于临床化学,我们的客户也有将这个规格的产品应用于免疫学研究的。此时,一个标准化的分析方法就变得尤为重要。
3) RZ>1 活性 >100u/mg,主要应用于血糖试纸和尿液分析试纸。
4) RZ>0.6 活性 >60u/mg ,主要应用于尿液分析试纸。
安全信息
个人防护装备 Eyeshields, Gloves, type N95 (US), type P1 (EN143) respirator filter
WGK德国 3
F 10-21
有关该产品的运输、使用、弃置等的进一步信息,请致电15221999938索取该产品的MSDS。
贮存与运输
2-8°C。避光,防潮。
 
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Sigma品牌代理商

Sigma品牌代理商–上海金畔
1. Sigma品牌介绍
sigma-aldrich是全球最大的化工试剂生产商,Sigma-Aldrich 是一个生物/ 化学试剂领先的高科技企业。我们的生化试剂, 有机化学试剂和试剂盒广泛应用于基因组学研究,生物科技,药物
研发,疾病诊断和化工生产上。
2. Sigma重点产品
生化试剂
3. Sigma官网
http://www.sigmaaldrich.com/
4. 金畔生物代理Sigma品牌联系方式
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食品中增味剂标准品 — 上海金畔生物科技有限公司

食品中增味剂标准品 — 上海金畔生物科技有限公司
食品增味剂也可称为风味增强剂或鲜味剂。增味剂是指补充或增强食品原有风味物质。一些食品添加增味剂后,呈现鲜美滋味,增加食欲和丰富营养。食品增味剂的使用对食品产业的发展起着重要的作用,但若不科学地使用也会带来很大的负面影响 . 使用食品添加剂最重要的原则是安全性和有效性,其中安全性更为重要。衡量食品添加剂是否安全有一个重要概念 —— 每日允许摄入量(即 ADI 值),每天摄入这个数量的添加剂,不会有问题。作为食品增味剂要同时具有三种呈味特性: ①   本身具有鲜味,而且呈味阈值较低,即使在较低浓度时也可以刺激感官而显示出鲜美的味道。
上海金畔生物提供食品中增味剂标准品。
产品信息:
货号  中文品名  英文品名  描述  规格
C10023900 N- 乙酰 -L- 硒代蛋氨酸   标  N-Acetyl-L-Selenomethionin  [210910-25-1]  0.1 g
C10062950  DL- 丙氨酸   标准品  DL-Alanine  [302-72-7]  0.1 g
C10300200  DL- 精氨酸盐酸盐   标准品  DL-Arginine hydrochloride  [7200-25-1]  0.1 g
C10304950  DL- 天(门)冬氨酸   标准  DL-Aspartic acid  [617-45-8]  0.1 g
C14034400  DL- 谷氨酸   标准品  DL-Glutamic acid  [617-65-2]  0.1 g
C14037000  甘氨酸 ( 氨基乙酸 )  标准  Glycine  [56-40-6]  0.25 g
C14057150  5‘- 单磷酸鸟苷   标准品  Guanosine-5′-monophosphate  N/A  0.1 g
C14213100  DL- 组氨酸   标准品  DL-Histidine  [4998-57-6]  0.1 g
C14429000  DL- 异亮氨酸   标准品  DL-Isoleucine  [443-79-8]  0.1 g
C14629300  DL- 亮氨酸   标准品  DL-Leucine  [328-39-2]  0.1 g
C14655000  DL- 赖氨酸   标准品  DL-Lysine  [70-54-2]  0.1 g
C15021000  DL- 蛋氨酸   标准品  DL-Methionine  [59-51-8]  0.1 g
C16345600  L(-)- 脯氨酸   标准品  L(–Proline  [147-85-3]  0.1 g
C16935700  DL- 丝氨酸   标准品  DL-Serine  [302-84-1]  0.1 g
C17575000  DL- 苏氨酸   标准品  DL-Threonine  [80-68-2]  0.1 g
C17895000  DL 色氨酸   标准品  Tryptophan  [54-12-6]  0.5g
C17896000  DL- 酪氨酸   标准品  DL-Tyrosine  [556-03-6]  0.1 g
C17899950  DL- 缬氨酸   标准品  DL-Valine  [516-06-3]  0.1 g
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上海金畔生物科技有限公司提供 T细胞分离用尼龙毛柱

上海金畔生物科技有限公司提供 T细胞分离用尼龙毛柱

在研究体内及体外的免疫系统时,分离淋巴细胞群是一个关键步骤。因为现在市场上并没有针对B细胞的特异性抗血清,所以分离淋巴细胞中的T细胞并不是十分方便。T细胞尼龙毛分离法利用了尼龙毛对B细胞的亲和力,从而使T细胞在没有严重损伤的情况下达到的足够的纯度。因为这个方法不像流式和磁珠费用昂贵,而且操作简便,所需要的条件也不高,是一种非常实用的方法。
首先要指出的是实验中所使用的是分离T细胞专用的尼龙毛(Nylon Fiber),不是化工上的尼龙纤维,曾经有人问过我这种问题,如果你买错了,可是做不出来的!
现在市面上有尼龙毛填料,也已经有了商品化的尼龙毛柱子,这两者的区别主要是以下两点:1.商品化的柱子的填料量是已经定好的,有一个确定的上样量范围。而自己买填料装柱可以控制填料量,也就是可以控制上样量,这对于样本量非常少,或是样本量非常大的实验需求非常合适。2.商品化的柱子已经经过了无菌处理(一般是辐射灭菌),而自己装柱当然就要自己灭菌了。
操作方法:
1.秤取1.5g尼龙毛装入20-30ml玻璃容器或注射器内(要可以灭菌的),填料的体积控制在15毫升左右(注射器上有标记,所以还是比较好控制的),因为尼龙毛的松紧关系到T细胞的回收率,所以要特别注意。注射器下端配接5厘米左右长的带有弹簧夹的橡皮管。
2. 加入大量的PBS平衡柱子后,用铝箔包裹,并置于适当的容器内,高压灭菌15分钟。
(商品化尼龙毛柱以上步骤可以省略,经过PBS平衡后可以直接进行下列步骤。)
3. 灭菌的尼龙毛柱垂直固定后放于超净台内,顶部以铝箔覆盖,避免污染。
4. 注射器下端,橡皮管,弹簧夹用无水酒精消毒。打开弹簧夹调节流速在大约3-4ml/min。
5.首先,加入3-4倍柱体的无血培养基平衡,之后加入相同体积的含有血清的培养基平衡(上述培养基都要预热),最后等培养基液面接近柱填料液面时,关闭弹簧夹。
6. 样本细胞悬浮液浓度控制在约5×108cells/ml,上样量一般是1/3-1/5柱体积。样品加入之后,再加入少量培养液,然后关闭弹簧夹。
7.覆盖铝箔,垂直固定,置于消毒过的容器中,于培养箱内37℃孵育1小时。此过程中柱子必须要保持垂直状态。
8. 从培养箱中拿出柱子,置于超净台内,除去铝箔。接上按照4.中的方法消毒的弹簧夹和橡皮管,加入适当体积经37℃预热的培养基,打开弹簧夹控制流速在3-4 mL/min,流出约5ml之后,流出的培养液基变得不透明,此时其中含有T细胞,收集这一部分培养基。
9. 基本上何时结束收集取决于流出液体中细胞的浓度,实际上,收集的量达到一个柱体积时就可以停止收集,因为即使收集更多的量,回收率几乎不会增加。
10 .上述操作后,实验结果如下:
细胞的回收率为: 15~20 %
T细胞含量: 85~95 %
B细胞污染率: 1 5 %
多数细胞被确定为T细胞。
(注)收集粘附于尼龙毛上的细胞时,将T细胞收集完毕后的尼龙毛再无菌操作的状态下取出,转移到适当的容器中,用镊子小心的将尼龙毛松开,粘附的细胞可以洗到培养基中。或者将注射器芯插入注射器内,通过压力使的粘附的细胞随着液体流出。
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玻璃奶(Glassmilk)法凝胶回收试剂盒GENECLEAN(R) Turbo Kit

玻璃奶(Glassmilk)法凝胶回收试剂盒GENECLEAN(R) Turbo Kit 

  • 价  格: 询价
  • 货  号: 111102200
  • 英文  名: GENECLEAN® Turbo Kit

 

  •    快速回收和浓缩DNA片段,能有效的去除盐、蛋白质、反应体系中的限制性内切酶或修饰酶
  • 高结合力:柱结合10ug,常规为5ug左右
  • 高效回收率:大于95%,常规试剂盒60-90%不等。玻璃奶膜覆盖于过滤外层,不会造成微粒的流失,保证了回收率,大大高于其他方法。玻璃奶在高盐和低ph溶液时会优先结合核苷酸,反之可以使核苷酸很快地与玻璃奶分离至低盐溶液或者水中,保证了高的回收率。
  • 片段范围广:100bp-300kb,常规100bp-50kb,回收的片段更为完整,能进行大片段DNA的回收,减少片段的断裂。而常规胶回收微粒松散,容易造成多个微粒对大片段的同时吸附造成断裂。
  • 去处杂质强:从凝胶或溶液中快速回收和浓缩DNA片段,能有效的去除:琼脂糖、磷酸酶BAP/CIP/SAP、限制性内切酶、逆转录酶、Tag聚合酶、末端转移酶、PCR引物/接头、残留的有机溶剂、盐和缓冲液成分、溴化乙锭、激酶、T4连接酶、DNA酶等
  • 快速:15分钟内可完整12个样品的回收,不再需要反复的冲洗,再也不需要乙醇反复过柱
  • 有效:纯化后的样本下游应用效果良好,可用于:测序,克隆,PCR,转化,显微注射,微阵列分析,转染等。

操作步骤
样本准备:含有所需DNA片段凝胶切割或PCR反应液体积测定

  • 加入Geneclean trubo 钠盐溶液,加入比例:胶回收 Geneclean trubo钠盐溶液:凝胶= 100ul:100mg ,55℃孵育5分钟 PCR反应液样本体积的5倍
  • 取上一步准备好的DNA溶液,加入滤芯,室温14000rpm离心5sec后,清空收集管。控制每次滤芯内溶液不多于600ul,如大于600ul,分几次加入并离心。
  • 加入500ul清洗液,室温14000rpm离心5sec,清空收集管。
  • 室温14000rpm离心4min。
  • 使用1ml的吸头在#1的位置小心加入样本液
  • 使用注射器或泵(带有2英寸长,18号或更小钝角针头)在#2的位置真空抽出收集管中的液体。
  • 取用一个新的收集管,准备洗脱。加入30ul洗脱液室温孵育5min,室温14000rpm离心1min,收集管内即为所需的DNA溶液,可用于测序,克隆,PCR,转染等操作。

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货号 名称 规格 价格
111102200 GENECLEAN® TURBO 50 preps 询价
111102400 GENECLEAN® TURBO 100 preps 询价
111103200 GENECLEAN® TURBO FOR PCR 50 preps 询价
111103400 GENECLEAN® TURBO FOR PCR 100 preps 询价
111104200 GENECLEAN® TURBO 96 1×96 preps 询价
111104400 GENECLEAN® TURBO 96 4×96 preps 询价

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