Whatman 滤膜 10538744 GRADE 8-S 8x10IN 100/PK GRADE 8-S 8x10IN 100/PK
日度归档:2024年8月1日
Whatman 滤膜 9911-1302 Uniflo 13 mm 0.22 m PTFE 500/PK
Whatman 滤膜 9911-1302 Uniflo 13 mm 0.22 m PTFE 500/PK Uniflo 13 mm 0.22 m PTFE 500/PK
Whatman 滤膜 10312744 604 1/2折叠滤纸125mm/100
Whatman 滤膜 10312744 604 1/2折叠滤纸125mm/100 604 FF 125MM 100/PK
Pall颇尔滤膜 MCPM02C68 SPIN FILTER 0.2UM 5ML 100PK
Pall颇尔滤膜 MCPM02C68 SPIN FILTER 0.2UM 5ML 100PK 607 4857
anti-p38抗体【E229 ](ab170099)
种属反应性
靶标
功能 受环境应激,促炎细胞因子和细菌脂多糖(LPS)的磷酸化,一些转录因子,如ELK1和ATF2和下游的激酶,如MAPKAPK2和mapkapk5。 在某些细胞因子的生产起着至关重要的作用,例如白细胞介素-6。 可能参与了EPO mRNA的稳定低氧胁迫。 亚型mxi2激活有丝分裂原刺激的氧化应激和知之甚少的磷酸化ELK1和ATF2。 Isoform Exip可能在细胞凋亡的早期发病中起一定的作用。 组织特异性 脑、心、胎盘、胰腺、骨骼肌。 在肺癌的表达程度较轻,肝、肾。 序列相似性 属于蛋白激酶家族。 CMGC丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族。 MAP激酶家族。 包含1个蛋白激酶结构域。 结构域 TXY主题包含苏氨酸和酪氨酸残基的磷酸化激活的MAP激酶。 翻译后修饰 双重磷酸化对thr-180和tyr-182,激活酶。 磷酸化后,DNA损伤,可能是通过ATM、ATR。 细胞定位 细胞质. 核。 -
Whatman 滤膜 29168192 TE35, PTFE, 0.2 Micro meter, 50 mm, 50/pk – PROMO
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Whatman 滤膜 7410-004 Nylon, 尼龙膜 白色平滑, 1.0m 47mm 100/盒
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抗HLA一抗体[ ep1395y ](ab52922)
Whatman 滤膜 10342570 GR 3645 450x690MM SB 100/PK
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荧光染料D41B0 FAM alkyne 5-isomer 25 mg
lumiprobe荧光染料D41B0 FAM alkyne 5-isomer 25 mg lumiprobe荧光染料FAM 炔基 5-isomer 25 mg 295
OXOID培养基 CM0777B Raka-Ray培养基 RAKA-RAY MEDIUM 500G
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Whatman 滤膜 9700900757 F421-01 0.5INX100M 1/PK
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Whatman 滤膜 6891-2507 GD/X 25针头式滤器0.7m GF/F 1500/盒
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Axygen试剂盒 AP-GX-50G AxyPrep DNA凝胶回收试剂盒
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Whatman 滤膜 110418 NUC PC 20MM X 50M 0.6uM
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Whatman 滤膜 10300103 589/2滤纸圆型40.5mm/100
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Whatman 滤膜 UN203APENYL Mini UniPrep 非针头式滤器 ,Amber 0.2m Nylon/100
Whatman 滤膜 UN203APENYL Mini UniPrep 非针头式滤器 ,Amber 0.2m Nylon/100 MUP AMB 0.2uM NYL 100/PK
桌上型自动分析装置|生命科学/临床检验药|关东化学株式会社
血液化验,病人的组织和内脏器官的状态把握的有效手段的事,病的诊断和治疗效果确认等被广泛使用。 但是,所谓通用生化学自动分析装置,这本身就是一个大型,而且昂贵,所以医院和诊所之类的小规模设施导入难,检查委托外部的情况几乎。 桌上型血液化学检查装置ビオリス12 i及ビオリス15 i新是各种各样的特长,具备了,小规模医疗设施和检查专职工作人员没有面向设施作为最适合。 弹出窗口打开 生化学检查 该文章由WP-AutoPost插件自动采集发布
Whatman 滤膜 3017-915 17号层析纸方型,460*570mm/25
Whatman 滤膜 3017-915 17号层析纸方型,460*570mm/25 GR 17CHR 46x57CM 25/PK
Whatman 滤膜 2707NS 囊式滤器AS 75, 0.45m, 未灭菌in/out0.25-0.125 英寸SB/5
Whatman 滤膜 2707NS 囊式滤器AS 75, 0.45m, 未灭菌in/out0.25-0.125 英寸SB/5 POLYCAP 75 0.45 AS 5/PK A/A
BD培养基 211716 500 g EA BBL Thioglycollate Medium, Brewer Modified 改良布氏(Brewer)硫代羟乙酸盐培养基
BD培养基 211716 500 g EA BBL Thioglycollate Medium, Brewer Modified 改良布氏(Brewer)硫代羟乙酸盐培养基
Amresco 0481-25G 2'-DEOXYTHYMIDINE 2’-脱氧胸苷
Amresco 0481-25G 2′-DEOXYTHYMIDINE 2’-脱氧胸苷
水溶性荧光染料D73B0 Sulfo-Cyanine5.5 alkyne 25 mg
水溶性lumiprobe荧光染料D73B0 Sulfo-Cyanine5.5 alkyne 25 mg 水溶性lumiprobe荧光染料Sulfo-Cyanine5.5 炔基 25 mg 690
Whatman 滤膜 2702M 囊式滤器TF 75, 0.2m, in-/out0.25 英寸 MNPT/5
Whatman 滤膜 2702M 囊式滤器TF 75, 0.2m, in-/out0.25 英寸 MNPT/5 POLYCAP 75 0.2 PTFE 5/PK F/F
荧光染料41460 Pyrene phosphoramidite dU 1 g
lumiprobe荧光染料41460 Pyrene phosphoramidite dU 1 g lumiprobe荧光染料Pyrene phosphoramidite dU 1 g 880
Hampton蛋白悬滴结晶板 HDP Hanging Drop Crystallization Plate
Hampton蛋白悬滴结晶板 HDP Hanging Drop Crystallization Plate
美国Hampton Research公司位于加利福尼亚州,是一家专门从事蛋白质晶体研究的生产商。该公司向全球科研人员提供全面的晶体研究试剂和相关实验耗材,同时提供晶体设计和合成方面的定制服务。Hampton Research公司以其先进的生物大分子结晶技术和广泛实用的产品线,不仅为全世界晶体研究人员的工作带来了便捷,而且也受益于科研人员的回馈不断发展自己,目前已成为晶体研究领域最受信赖的品牌之一。
Hampton research主要产品:
Crystallization Screens 用于筛选和优化蛋白质/多肽/核酸结晶的一系列经验证的高精配方型溶液
Optimize Reagents 结晶级别盐类,聚合物,有机溶液或缓冲液
Crystallization Plates, Hardware & Accessories 结晶板(悬滴法和坐滴法,微量透析,微配液,自由界面扩散,凝胶以及无容器悬浮法)及其他配件
Cryocrystallography 低温晶体学耗材如 Crystalcap system,cryoloops
Goniometer Heads&Supplies 测角器头和配件
Protein Crystallization Standards 结晶级别标准蛋白
Custom Shop Crystallization Reagents 定制试剂盒和结晶溶液内的单一组分
StockOptions Kits 内含盐类,缓冲液和冷冻液的简便型试剂盒
Tools,Seeding&Resin 结晶用探针,结晶笔,seeding法结晶工具
Capillary Mounts & Supplies 毛细管,玻璃纤维, 蜡,黏合剂和密封剂
Hampton蛋白悬滴结晶板 HDP Hanging Drop Crystallization Plate
HDP Hanging Drop Plate
Single Well with Tool
Hanging Drop Wells
Applications—Hanging drop crystallization
Features
Made from optically superior polymer (UVP)
Allen key novel crystal plug closure system
Wells are micro-numbered
Description 描述:
The Swissci Hanging Drop Crystallization Plate is a breakthrough for protein crystallization in a 96-well format. For the first time individual wells can be identified and removed without any disturbance to the growing crystals inside the plate.Description
The plate has been developed by Swissci AG together with leading Crystallographers. It is the result of many years of experience in successful robotic high-throughput crystallization.
The Hanging Drop Crystallization Plate offers unique properties that make it ideal for both nanoliter crystallization screening and microliter optimization alike. Made from optically superior polymer (UVP) and with a new design of the wells, the plate allows easy crystal viewing and retrieval. The system is fully covered by design and patent protection.
The Advantages of the Hanging Drop Crystallization Plate
Easy Crystal Retrieval
Raised wide wells make the crystal mounting especially easy. Allen key system allows for smooth removal and subsequent microscopic investigation / X-ray with the novel crystal plug closure all included in the system.
Easy Viewing
The wells are wide conical and have a lens effect for perfect illumination. The micro-numbering ensures you will never loose the location under the microscope.
The optically superior polymer is UV transmissible and can be used to differentiate between salt and protein crystals.
Integral Sealing
Wide partition walls between each well provides a high surface area for very good sealing with the advanced quality sealing tape. The sealing tape is integrated into the kit so there is no need to purchase additional parts prior to starting a procedure.
Wide Range of Volumes
Typical volumes are 50 – 200 µl of reservoir and 10 nanoliter – 5 microliter drop size.
SBS Standard
The complete plate is designed to the 96-well SBS standard for all common holders.CAT NO NAME DESCRIPTION HR3-187 Hanging Drop Crystallization Plate (Swissci) 10 plate case Hampton蛋白悬滴结晶板 HDP Hanging Drop Crystallization Plate 相关产品:
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Whatman 滤膜 7700-1101 384孔100L过滤板,透明PS,GF/C膜,长流孔 /50 384W 100uL DYE TERM 50/PK
康宁corning 2897 PLATE,96WL,VB,PVC,WO/LID,NS,B, 96孔板 V形底 PVC(聚氯乙烯)材质 无盖 未灭菌 散装 25个/包
康宁corning 2897 PLATE,96WL,VB,PVC,WO/LID,NS,B,
96孔板 V形底 PVC(聚氯乙烯)材质 无盖 未灭菌 散装 25个/包 4包/箱 1615.76荧光染料22090 Cyanine3.5 carboxylic acid 5 mg
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康宁corning 6520 PCR LID FOR MODELS,C,M,H,PC,IN PCR板盖 聚碳酸酯材质 独立包装 1个/包
康宁corning 6520 PCR LID FOR MODELS,C,M,H,PC,IN
PCR板盖 聚碳酸酯材质 独立包装 1个/包 25包/箱 1379.23Whatman 滤膜 5202-200 202 20CM 100/PK
Whatman 滤膜 5202-200 202 20CM 100/PK 202 20CM 100/PK
荧光染料D5530 Perylene azide 25 mg
lumiprobe荧光染料D5530 Perylene azide 25 mg lumiprobe荧光染料Perylene 叠氮基 25 mg 410
Whatman 滤膜 10537205 ACCUFLOW G 80x300MM 10/PK
Whatman 滤膜 10537205 ACCUFLOW G 80x300MM 10/PK ACCUFLOW G 80x300MM 10/PK
简易反射式光度计~RQ挠性~|简易分析|一般分析纯试剂|试剂|关东化学株式会社
小型反射式光度计RQ花线
测定器《RQ挠性》 手掌大小的反射式光度计“RQ弹性工作”和专用的试验纸“リフレクトクァント”用简易分析系统。 土壤和作物体中包含,氮,磷,钾等营养成分、饮料中的维生素C,排水中铵等,试料溶液中的各成分的浓度的简单并且迅速可以测试。 现在,约有30种金属、非金属,有机化合物的测量,结果是高精度。 能随身携带,现场的实时的分析最适合。 在所有领域利用。 各种应用程序的要求的话,请咨询您。 该文章由WP-AutoPost插件自动采集发布
和光纯药WAKO 129-04861 LY 294002 5mg
和光纯药WAKO 129-04861 LY 294002 for Biochemistry 154447-36-6
BD培养基 225650 500 g EA Difco Fluid Thioglycollate Medium 液体硫乙醇酸盐培养基
BD培养基 225650 500 g EA Difco Fluid Thioglycollate Medium 液体硫乙醇酸盐培养基
whatman 3MM滤纸的应用 3030-861 3MM CHR 20X20CM 100/PK 3MM层析纸方型,200mm*200mm/100
whatman 3MM滤纸的应用
whatman 3MM滤纸的应用 3030-861 3MM CHR 20X20CM 100/PK
whatman 3MM滤纸的应用—杂交筛选——cDNA序列作为探针
1.如上述将文库铺平板,噬菌斑杂交实验用E.coli宿主菌株Y1088。
2.噬菌斑于42℃生长过夜。
3.从温箱取出平板,置4℃冷却至少1h。
4.膜剥离:首先,用软铅笔在干的硝酸纤维素滤膜上给准备影印的平板编号。其次,从平板的中央开始向边缘小心将滤膜铺在菌台上。当滤膜完全变湿后(颜色变灰),再等30s。同时,用针头在平板上标出滤膜的3个不对称位置。小心将滤膜从平板上剥离,接触面向上放在一张干净的Whatman 3MM滤纸上。在进行下一步骤之前,所有的平板重复步骤4。
5.将滤膜接触面向上漂浮在变性液(0.5 mol/L NaOH; 1.5 mol/LNaCl)中5min。
6.中和5min。
7.用2×SSC洗涤5min。
8.将滤膜放在一张新的Whatman3MM滤纸上,用铅箔将滤膜和滤纸一起包住。
9.在真空炉中80℃烘烤2h。
10.用6×SSC预先短暂地湿润滤膜,然后用预洗液(50 mmol/LTris-Cl pH8.0; 1mol/L NaCl; 1mmol/L EDTA; 0.1%SDS)于68℃预洗涤至少1h。用一个盘子放在水浴摇床上。
11.将25张滤膜转移到一个装有50ml杂交液(5×SSPE;1×Denhardt’s液;100μg/ml cT-DNA;0.1%SDS)的贮存罐内(直径至少90mm),68℃预杂交2h。
12.对于每ml杂交液,2倍的105至1×106cpm的双链探针经沸水浴变性10min后,迅速放冰上冷却。
13.变性探针立即加到预杂交混合液中。
14.在封口的贮存罐内于68℃杂交过夜,不断地晃动以防滤膜粘在一起。
15.杂交结束后,滤膜用2×SSC,0.01%SDS于室温洗涤3次约1h。
16.将潮湿(防止干燥)的硝酸纤维素滤膜放在一张硬纸或X光片上,用放射性墨水在针头标签上作标记。
17.滤膜用塑料包装袋(如Saran)包住,然后加上增感屏在X光片上于-70℃曝光过夜。whatman 滤膜滤纸滤器 WB100007 (已停产)MICROPUNCH 2.0MM 1/PK HARRIS 2.0mm 打孔器 盒/1 whatman 滤膜滤纸滤器 3030-662 3MM CHR 7.5CMx100M 1RL/PK 3MM层析纸卷状,75mm*100m whatman 滤膜滤纸滤器 3030-681 3MM CHR 15CMx100M 1RL/PK 3MM层析纸卷状,150mm*100m whatman 滤膜滤纸滤器 3030-704 3MM CHR 27CMX100M 1RL/PK 3MM层析纸卷状,270mm*100m whatman 滤膜滤纸滤器 3030-861 3MM CHR 20X20CM 100/PK 3MM层析纸方型,200mm*200mm/100 whatman 滤膜滤纸滤器 3030-917 3MM CHR 46X57CM 100/PK 3MM Chr sheets, 460x 570 mm, 100/pk Hampton HR2-643 Parabar 10312 Hampton代理
Hampton HR2-643 Parabar 10312 Hampton代理
Hampton蛋白结晶试剂耗材
Hampton Research代理
欢迎访问Hampton Research官网或者咨询我们获取更多有关蛋白结晶试剂耗材产品信息。
Parabar 10312 (previously known as Paratone)
HR2-643 Parabar 10312 100 ml bottle
HR2-862 Parabar 10312 5 ml bottle
Applications
Oil based cryoprotectant
Features
Synonyms used in the crystallographic literature: Paratone® N, Paratone® 8277, Infineum V8512
Oil based cryoprotectant
Description
Parabar 10312 is a viscous cryoprotectant for both small and large molecule crystallography.1 Mildly air-unstable, small molecule compounds can be coated with Parabar under an inert atmosphere. The Parabar protected crystal sample can be cryocooled in a chilled nitrogen gas stream. Parabar has also been used successfully as a cryoprotectant for biological macromolecule crystals. Used during cryocrystallography to displace and reduce the amount of water (mother liquor, reagent) on the crystal after the crystal is mounted in a cryoloop. Coating the crystal with Parabar can minimize evaporation from the crystal and reduce exposure and slow diffusion of air (oxygen) to the crystal.
HR2-643 Parabar 10312 is supplied as 100 ml in an amber glass bottle, no applicator rod.
HR2-862 Parabar 10312 is supplied as 5 ml in an amber glass vial with glass applicator rod in screw cap lid.
The viscosity of Parabar can be reduced to improve handling with fragile needle and blade crystals by mixing 50:50 with Paraffin Oil.
Parabar is a blend of polyisobutylenes with a Staudinger molecular weight of about 20,000 and contains about 20% polymer.
Refractive index 1.48487 at 20 degrees Celsius.
Kinematic viscosity 641 cSt at 100 degrees Celsius. Kinematic viscosity ratio 2.05 at 100 degrees Celsius.
Clear to slightly hazy is appearance.
Synonyms used in the crystallographic literature: Paratone® N, Paratone® 8277, Infineum V8512
Paratone® is a registered trademark of Chevron Corporation.CAT NO NAME DESCRIPTION HR2-643 Parabar 10312 100 ml bottle, each HR2-862 Parabar 10312 5 ml bottle with applicator rod, each References 1. H. Hope, Cryocrystallography of biological macromolecules: a generally applicable method. Acta Cryst. (1988) B44, 22-26. 2. Structure of the ligand-binding domain (LBD) of human androgen receptor in complex with a selective modulator LGD2226. F. Wang, X.- Liu, H. Li, K.- Liang, J. N. Miner, M. Hong, E. A. Kallel, A. van Oeveren, L. Zhi and T. Jiang. Acta Cryst. (2006). F62, 1067-1071 3. H. Hope, Annu. Rev. Biophys. Chem. 1990 19:107-126 4. S. Parkin and H. Hope, J. Appl. Cryst. (1998) pages 945-953 康宁corning 431252 FLASK,FERNBACH,3.0L,VENT CAP,S 三角培养瓶 3.0L 透气盖 PC(聚碳酸酯)材质 灭菌(cf431144/430421/430183/430422) 1个/包
康宁corning 431252 FLASK,FERNBACH,3.0L,VENT CAP,S
三角培养瓶 3.0L 透气盖 PC(聚碳酸酯)材质 灭菌(cf431144/430421/430183/430422) 1个/包 4包/箱 2802.83Biopette E™多道电动移液器
品牌:美国Labnet
订货号:P3608-20-230V P3612-20-230V等
产品介绍
Biopette ETM Multichannel Electronic Pipettes
Biopette ETM多道电动移液器是出于高效移液的设计理念,根据96孔模式,制造了8道和12道电动移液器。两种移液器都有四个量程,覆盖0.5ul至1,200ul范围的体积。高度精确的步进马达控制活塞,保证了它的精确性和准确性,使您的工作省时省力。轻便的重量,不管您是使用左手还是右手,您都能感觉轻松自如。
从用户的角度考虑,大型的液晶显示器和简单的操作界面,用户可以方便的在六种移液模式中转换。不需要更换吸头,您就可以在“MD”模式下迅速的移取96孔板的液体。
每支移掖器都有自校功能。移掖器的下部分可以轻松的取出进行高压灭菌。此外,每支移液器都含有移液器架、锂电池和充电器,方便使用。
n 舒适而有省力的移液操作
n 高效的96孔板操作
n 友好的操作界面,特有的6种移液模式
n 优秀的精确度和准确度
n 全自动马达驱动
&nbs
p;规格
体积范围 适用吸头 增量 精确度(平均误差) 准确度(重现性)
0.5-10ul 10ul 0.1ul +4.0 to +1.0% <2.5 to <0.4%
2-20ul 10ul 0.1ul +5.0 to +1.0% <2.0 to <0.3%
10-200ul 200ul 1.0ul +2.0 to +0.6% <1.0 to <0.15%
100-1,200ul 1,000/1,200ul 1.0ul +1.5 to +0.5% <0.6 to <0.15%
注:大多数厂家生产的10ul吸头都可以适配20ul的移液器
订货信息
订货号 &n
bsp; 参数P3608-10-230V Biopette ETM 电动移液器,0.5-10ul,8道,带充电器,230V
P3608-20-230V Biopette ETM 电动移液器,2-20ul,8道,带充电器,230V
P3608-200-230V Biopette ETM 电动移液器,10-200ul,8道,带充电器,230V
P3608-1200-230V Biopette ETM 电动移液器,100-1200ul,8道,带充电器,230V
P3612-10-230V Biopette ETM 电动移液器,0.5-10ul,12道,带充电器,230V
P3612-20-230V Biopette ETM 电动移液器,2-20ul,12道,带充电器,230V
P3612-200-230V Biopette ETM 电动移液器,10-200ul,12道,带充电器,230V
P3612-1200-230V Biopette ETM 电动移液器,100-1200ul,12道,带充电器,230V
P3600-BAT 选配的锂电池,适配任何电压
P3615-CS 选配的电池装置,包括锂电池和充电器,230V,EU plug
P3616-CS 选配的电池装置,包括锂电池和充电器,230V,UK plug
P3617-CS 选配的电池装置,包括锂电池和充电器,230V,US plug
P3618-CS 选配的电池装置,包括锂电池和充电器,230V,AU plug
P3628 Biopette ETM 电动移液器支架(可放一支)
P3630 Biopette ETM 电动移液器支架,聚丙烯酸材质(可放三支)
P3635 Biopette ETM 电动移液器圆形支架(可放六支)
注:当订购230U的移液器时,注意在订货号后面加-EU,-UK,-AU
当订购120U的移液器时,注意在订货号后面除去-230V
-
上海金畔生物科技有限公司
文章号:256-256
实验器具用清洁剂清洁~~鹿|实验补助剂|一般分析纯试剂|试剂|关东化学株式会社
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T细胞尼龙毛柱分离法
上海金畔生物科技有限公司提供T细胞尼龙毛柱
简单介绍
在研究体内及体外的免疫系统时,分离淋巴细胞群是一个关键步骤。因为现在市场上并没有针对B细胞的特异性抗血清,所以分离淋巴细胞中的T细胞并不是十分方便。T细胞尼龙毛分离法利用
了尼龙毛对B细胞的亲和力,从而使T细胞在没有严重损伤的情况下达到的足够的纯度。
T细胞尼龙毛柱分离法的详细介绍
T细胞尼龙毛柱分离法
在研究体内及体外的免疫系统时,分离淋巴细胞群是一个关键步骤。因为现在市场上并没有针对B细胞的特异性抗血清,所以分离淋巴细胞中的T细胞并不是十分方便。T细胞尼龙毛分离法利用
了尼龙毛对B细胞的亲和力,从而使T细胞在没有严重损伤的情况下达到的足够的纯度。因为这个方法不像流式和磁珠费用昂贵,而且操作简便,所需要的条件也不高,是一种非常实用的方法
。
(在此我向各位解释一下,现在分离T细胞的方法主要是三种,流式,磁珠法,尼龙毛法。与前两种方法相比,尼龙毛法的优势在于无需特定的设备仪器,一般的实验室均有条件操作;价格相
对低廉;可以进行大量样本操作。)
首先要指出的是实验中所使用的是分离T细胞专用的尼龙毛(Nylon Fiber),不是化工上的尼龙纤维,曾经有人问过我这种问题,如果你买错了,可是做不出来的!其次,现在市面上的尼龙毛
也是良隽不齐,也有同仁反应买到的尼龙毛加入缓冲液以后成了一团糨糊,根本没法使用,这个问题就要靠各位的慧眼了。
现在市面上有尼龙毛填料,也已经有了商品化的尼龙毛柱子,这两者的区别主要是以下两点:
1. 商品化的柱子的填料量是已经定好的,有一个确定的上样量范围。而自己买填料装柱可以控制填料量,也就是可以控制上样量,这对于样本量非常少,或是样本量非常大的实验需求
非常合适。
2. 商品化的柱子已经经过了无菌处理(一般是辐射灭菌),而自己装柱当然就要自己灭菌了。
3. 商品化的柱子在实验的重复性上有着绝对的优势。自己装的柱子在填料的处理和装柱的松紧等方面不容易控制,差异性的控制就看你的实验技巧了。
操作方法:
1.秤取1.5g尼龙毛装入20-30ml玻璃或一次性注射器内(要可以灭菌的),填料的体积控制在15毫升左右(注射器上有标记,所以还是比较好控制的),因为尼龙毛的松紧关系到T细胞的回收率,
所以要特别注意。注射器下端配接5厘米左右长的带有弹簧夹的橡皮管。
2. 加入大量的PBS平衡柱子后,用铝箔包裹,并置于适当的容器内,高压灭菌15分钟。
(商品化尼龙毛柱以上步骤可以省略,经过无菌PBS平衡后直接进行下列步骤。)
3. 灭菌的尼龙毛柱垂直固定后放于超净台内,顶部以铝箔覆盖,避免污染。
4. 橡皮管,弹簧夹用无水酒精消毒后接注射器下端,打开弹簧夹调节流速在大约3-4ml/min。
5.首先,加入3-4倍柱体的无血培养基平衡;随后,之后加入相同体积的含有血清的培养基平衡(上述培养基都要预热),最后等培养基页面接近柱填料页面时,关闭弹簧夹。
6. 样本细胞悬浮液浓度控制在5×108cells/ml的,上样量一般是1/3-1/5柱体积(商品化的柱子一般都有推荐上样量)。样品加入之后,再加入少量培养液,然后关闭弹簧夹。
7. 柱上覆盖铝箔,移置于消毒过的容器中,37℃孵育1小时。此过程中柱子必须要保持垂直状态。
8. 从培养箱中拿出柱子,置于超净台内,除去铝箔。接上按照4.中的方法消毒的弹簧夹和橡皮管,加入适当体积经37℃预热的培养基,打开弹簧夹控制流速在3-4 mL/min,流出约5ml之后,
流出的培养液基变得不透明,此时其中含有T细胞,收集这一部分培养基。
9. 基本上何时结束收集取决于流出液体中细胞的浓度,实际上,收集的量达到一个柱体积时就可以停止收集,因为即使收集更多的量,回收率几乎不会增加。
10 。参考数据:
样本:小鼠脾脏(T细胞含量在30-40%,B细胞含量在55-60%)
细胞回收率:13-25%
B细胞污染率:小于15%
样本:大鼠脾脏(T细胞含量在30-35%,B细胞含量在55-65%)
细胞回收率:大于25%
B细胞污染率:小于15%
样本:人或兔外周血
细胞回收率 : 20-30% (人);25-35% (兔)
B细胞污染率:小于5% (人、兔)
(注)收集粘附于尼龙毛上的细胞时,将T细胞收集完毕后的尼龙毛在无菌操作的状态下取出,转移到适当的容器中,用镊子小心的将尼龙毛松开,粘附的细胞可以洗到培养基中。或者将注射
器芯插入注射器内,通过压力使的粘附的细胞随着液体流出。
产品信息
品牌 品名 规格
Wako T细胞尼龙毛柱 0.5g*10 (推荐用于小鼠脾脏)
Wako T细胞尼龙毛柱L型 1g*10 (推荐用于大鼠脾脏、人或兔子的外周血)
Wako T细胞尼龙毛 2g*5 (可按照自己的需要装柱,控制上样量)
Wako 小鼠淋巴细胞分离试剂 30mL*5 用于从小鼠脾脏,淋巴结,淋巴结悬浮液中分离淋巴细胞
Wako 人淋巴细胞分离试剂 100ml*6 用于从人血中提取淋巴细胞
Wako 铁粉(羰基铁)Iron Powder, from Iron Carbonyl 25g 直径25um,用于清除巨噬细胞
Wako κ-卡拉胶κ-Carrageenan 25g
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