WAKO LabAssay™ ALP Alkaline Phosphatase Assay Kit

上海金畔生物科技有限公司提供WAKO LabAssay™ ALP Alkaline Phosphatase Assay Kit
WAKO LabAssay™ ALP Alkaline Phosphatase Assay Kit
碱性磷酸酶定量检测试剂盒
可用于人,大鼠以及小鼠血清样本的检测
(本试剂盒仅为研究试剂,不可用于诊断或做其他用途。)
LabAssay™ ALP Alkaline Phosphatase Assay Kit 碱性磷酸酶定量检测试剂盒
【摘要】
碱性磷酸酶的活性检测试剂盒。常用于检测培养的成骨细胞、实验动物血清和骨组织中的碱性磷酸酶活性。
碱性磷酸酶(ALP)广泛分布于肝脏、骨、小肠之中。特别在骨代谢研究领域方面被用作为骨形成指标之一。本品是用p–硝基苯磷酸作为底物的碱性磷酸酶检测试剂盒,利用微孔板,可进行多种样品的检测。
【检测原理】
样品在含有p-硝基苯磷酸的碳酸盐缓冲液(pH9.8)中反应,在样品中的碱性磷酸酶作用下,p-硝基苯磷酸分解为p-硝基酚和磷酸。生成的p-硝基酚为碱性,呈黄色。根据测量其405nm的吸光值,计算出样品中碱性磷酸酶的活性。
 
291-58601 LabAssay TM ALP  [p-硝基苯磷酸基质法]
【性能】
检测范围:>0.06 mmol/L
标准曲线范围:0~0.5 mmol/L
再现性:CV<10%
【试剂盒组成】
底物————————-20片(溶解时:p-硝基苯磷酸二钠 6.7mmol/L)
底物溶解液——————-100ml×1瓶(2.0mmol/L氯化镁含有0.1mol/L碳酸盐缓冲液pH9.8)
反应终止液——————-100ml×1瓶(0.2mol/L氢氧化钠溶液)
标准液———————–10ml×1瓶(0.5mmol/L p-硝基酚溶液)
【试剂的配制】
底物缓冲液:1片底物溶解于5mL底物溶解液中。
反应终止液:直接使用。
系列稀释标准液:将标准液用蒸馏水依次稀释为0.5、0.25、0.125、0.0625 mmol/L等2倍率稀释液系列。
【标准操作法】
向96孔微孔板内添加100μl底物缓冲液和20μl样品,在微孔板震荡器上充分振荡1分钟后,37℃孵育15分钟。
添加80μl反应终止液,在微孔板震荡器上充分振荡1分钟后,用酶标仪测量405nm处的吸光值。同样方法进行空白(蒸馏水)对照和标准品的检测。
【活性单位的定义】
在pH9.8,37℃情况下,1分钟内生成1nmol p-硝基酚所需的酶的活性为1个活力单位(U)。
活性(U/μl)= C/15 ×a
C:由标准曲线得到的OD值(A实验值减去A空白值),计算p-硝基酚浓度(mmol/L=nmol/μl)
15:反应时间(min.)
a:样品的稀释倍数
当样品为成骨细胞时,使用本试剂盒前样本需要预处理
在48孔板上进行细胞培养后,除去培养基,用PBS冲洗感光板,各孔添加150μl 0.05%的曲拉通X,进行冻结→融化→冻结→融化操作。4℃,15,000rpm离心15分钟处理,将上清液移到新的辅助管,以此作为样品。
(注1)48孔板:培养时,一般不采用96孔板,多使用48孔板。
(注2) 曲拉通X的作用:溶解细胞膜,回收蛋白(细胞内含有ALP蛋白)的试剂。
(注3) 反复的冻结融化:原理不明,但这样做似乎可以提高ALP活性。
(注4) 也有不使用曲拉通X,用超声波降解法(超声波处理)对细胞造成物理性休克得到溶解产物的方法。
(注5) 曲拉通X的添加量:以150μL为例,孔中细胞约为20,000cell。
 
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D-乳酸检测试剂盒,D-Lactic Acid Assay Kit

D-乳酸检测试剂盒,D-Lactic Acid Assay Kit
名称:D-乳酸检测试剂盒
英文名:D-Lactic Acid Assay Kit
规格:50次
产地:爱尔兰
外观 :五玻璃瓶。
比重 :不适用
在水中的溶解度: 易溶
pH值: 7.0
气味: 无
粉末和液体形式
稳定性: 稳定 5年或以上(冷冻)
成分:
名称 比例
甘氨酰甘氨酸缓冲液 1瓶(玻璃)
烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 1瓶(玻璃)
D-谷氨酸丙酮酸转氨酶 1瓶(玻璃)
D-乳酸脱氢酶酶 1瓶(玻璃)
D-乳酸的标准品 1瓶(玻璃)
许多食品和饮料中都发现有D-乳酸.  由乳酸菌产生, D-乳酸存在于牛奶的发酵产品中比如酸奶,腌菜,腌肉和腌鱼中。牛奶、肉、和果汁的质量可以通过测定D-乳酸的含量来确定。在葡萄酒生产中,D-乳酸的产生标志着酒被乳酸菌***。在化学工业中,D-乳酸和L-乳酸都是生产过程中聚合物的原料,比如聚交酯和一些生物学上可降解的聚合物。同时也应用在化妆品和医药品中。
原理:
D-乳酸的定量分析需要两步酶化反应。  第一个反应由D-乳酸脱氢酶(D-LDH)催化,D-乳酸在烟酰腺嘌呤二核苷酸(NAD+)的催化下,被氧化成丙***酸
然而, 因为反应(1)的移动和D-乳酸和NAD+有着密切的关系,下一步反应需要消耗掉产生的丙***酸 在大量D-谷氨酸的存在下,通过在D-谷氨酸-丙***酸转氨酶(D-GPT)的作用下把丙***酸转化为D-丙氨酸和2-***戊二酸。(2).
以上两个反应中产生的 NADH 的量可以用来计量D-乳酸的量。  NADH的量通过340nm处增加的吸光率来测量。
特异性,敏感度, 线性和准确性:
此方法特异性检测D-乳酸.
此方法特异性检测D-乳酸和L-乳酸。在D-乳酸锂(MW=96.0)的检测中,大约可以预期结果为96%(W/W),L-乳酸锂可以得到98%(W/W)。
检测的灵敏度为0.005 个吸光度单位。相当于样品最大体积为1.50 mL 时,样品浓度为0.107 mg/L(或者 1.60 mg/L ,样品体积0.1 mL) 。检测限为 0.214 mg/L,这是在0.010的吸光度差异,样品最大体积为1.50 mL为得到的 。
D-乳酸检测的线性变化为0.5 到 30 μg 。在重复测定中,同一份样品溶液,可能产生0.005 到 0.010 个吸光光度值的差异。这就相当于样品1.50 mL,样品溶液中D-乳酸的浓度为0.107 到 0.214 mg/L 。如果样品在制备阶段被稀释过,结果要乘以稀释倍数F。如果样品制备阶段,称量过样品,比如10 g/L,可能会产生0.02 到 0.05 g/100 g 的差异。
干扰:
如果D-乳酸的转换在实验指定的时间内(大约5分钟)彻底完成,通常认为是没有发生任何干扰。不过,这个也可以进一步验证,通过在实验的完成时,向比色皿中加入D-乳酸混合物(大约每0.1mL15ug),吸光光度值有会明显增加。
样品中的干扰物质的分析可以通过加入一个内参来确定。需要进行一个标准品定量回收实验,通过这个回收实验(也就是在最初的提取步骤中向样品中加入D-乳酸)可以算出样品在处理和提取过程中的损失量。
D-Lactic Acid (D-Lactate) (Rapid)
For the rapid and specific assay of D-lactic acid in wine, beer, juice, milk, cheese, vinegar and meat products.
Catalogue Number: K-DATE
Content: 50 assays per kit
Appearance Five glass vials.
Specific Gravity not applicable
Solubility in Water Readily soluble.
pH Value 7.0
Odour none
Form powders and liquids
Stability stable in a freezer for five or more years
Ingredients Name CAS Proportion
Glycylglycine buffer 1 vial (glass)
Nicotinamide adenine dinucleotide 1 vial (glass)
D-Glutamate pyruvate transaminase enzyme 1 vial (glass)
D-Lactate Dehydrogenase enzyme 1 vial (glass)
D-Lactic acid standard solution 1 vial (glass)
K-DATE  D-乳酸快速检测试剂盒
乙醛检测试剂盒K-ACHYD13
乙酸 (ACS;分析仪格式)检测试剂盒K-ACETAF13
乙酸(ACS;手工格式)检测试剂盒K-ACET14
乙酸(AK;分析仪格式)检测试剂盒K-ACETAK14
乙酸(RM;快速手工格式)检测试剂盒K-ACETRM15
α-淀粉酶(“Ceralpha”方法)检测试剂盒K-CERA15
氨检测试剂盒K-AMIA16
氨(快速)检测试剂盒K-AMIAR16
直链淀粉 /支链淀粉检测试剂盒K-AMYL17
阿拉伯糖检测试剂盒K-ARAB17
L-阿拉伯糖/ D-半乳糖(快速)检测试剂盒K-ARGA18
阿拉伯木聚糖检测试剂盒K-ARAXYL18
L-精氨酸 /尿素 /氨(快速)检测试剂盒K-LARGE19
L-抗坏血酸检测试剂盒K-ASCO19
L-天冬酰胺酸/ L-谷氨酸酰胺/氨(快速)检测试剂盒K-ASNAM20
阿斯巴甜检测试剂盒K-ASPTM20
可用碳水化合物 /膳食纤维检测试剂盒K-ACHDF21
?-淀粉酶(“Betamyl”方法)检测试剂盒K-BETA21
β-(Mixedlinkage)检测试剂盒K-BGLU22
β-检测试剂盒K-YBGL22
β-葡聚糖酶(麦芽和微生物)检测试剂盒K-MBGL23
K-DATE  D-乳酸快速检测试剂盒
胆固醇检测试剂盒K-CHOL23
柠檬酸检测试剂盒K-CITR24
乙醇检测试剂盒K-ETOH24
蚁酸检测试剂盒K-FORM25
果糖(己糖激酶格式)检测试剂盒K-FRUCHK25
果糖(PAHBAH格式)检测试剂盒K-FRUC26
D-果糖 / D-葡萄糖检测试剂盒K-FRUGL26
D-果糖 / D-葡萄糖 (MegaQuant格式)检测试剂盒K-FRGLMQ27
半乳甘露聚糖检测试剂盒K-GALM27
葡甘露聚糖检测试剂盒K-GLUM28
D-葡萄糖酸 / D-葡萄糖酸内酯检测试剂盒K-GATE28
D-葡糖胺检测试剂盒K-GAME29
D-葡萄糖 (GOPOD格式)检测试剂盒K-GLUC29
D-葡萄糖(己糖激酶格式)检测试剂盒K-GLUHKR/L30
葡糖氧化酶检测试剂盒K-GLOX30
L-谷氨酰胺 /氨(快速)检测试剂盒K-GLNAM31
L-谷氨酸 (MSG)检测试剂盒K-GLUT31
甘油检测试剂盒K-GCROL32
D-3-羟丁酸检测试剂盒K-HDBA32
D-异柠檬酸检测试剂盒K-ISOC33
D-乳酸检测试剂盒K-DATE33
D-/L-乳酸检测试剂盒K-DLATE34
K-DATE  D-乳酸快速检测试剂盒
L-乳酸检测试剂盒K-LATE34
乳糖 / D-半乳糖(快速)检测试剂盒K-LACGAR35
乳糖/蔗糖 / D-半乳糖检测试剂盒K-LACSU35
乳果糖检测试剂盒K-LACTUL36
D-苹果酸检测试剂盒K-DMAL36
L-苹果酸检测试剂盒K-LMALR/L37
L-苹果酸 (Analyser格式)检测试剂盒K-LMALAF37
L-苹果酸(MegaQuant格式)检测试剂盒K-LMALMQ38
麦芽糖/蔗糖/ D-葡萄糖检测试剂盒K-MASUG38
D-甘露醇 / L-阿拉伯糖醇检测试剂盒K-MANOL39
D-甘露糖 / D-果糖 / D-葡萄糖检测试剂盒K-MANGL39
果胶鉴定检测试剂盒K-PECID40
植酸检测试剂盒K-PHYT40
Primary氨基氮 (NOPA)检测试剂盒K-PANOPA41
丙酮酸检测试剂盒K-PYRUV41
棉籽糖/ D-半乳糖检测试剂盒K-RAFGA42
棉籽糖 /蔗糖 / D-葡萄糖检测试剂盒K-RAFGL42
抗性淀粉检测试剂盒K-RSTAR43
D-山梨醇 /木糖醇检测试剂盒K-SORB43
破损淀粉检测试剂盒K-SDAM44
琥珀酸检测试剂盒K-SUCC44
蔗糖 / D-果糖 / D-葡萄糖检测试剂盒K-SUFRG45
K-DATE  D-乳酸快速检测试剂盒
蔗糖 / D-葡萄糖 (GOPOD格式)检测试剂盒K-SUCGL45
总膳食纤维检测试剂盒K-TDFR46
总淀粉 (GOPOD格式)检测试剂盒K-TSTA46
总淀粉(己糖激酶格式)检测试剂盒K-TSTAHK47
海藻糖检测试剂盒K-TREH47
尿素/氨(快速)检测试剂盒K-URAMR48
木聚糖酶 (Azo-Wax格式)检测试剂盒K-AZOWAX48
木聚糖酶(木聚糖酶 AX格式)检测试剂盒K-XYLS49
D-木糖检测试剂盒K-XYLOSE49